PRACTICA XLII (22/04/15)

DETERMINACIÓN CELULAR EN PORTA

INTRODUCCIÓN

La detección celular del grupo ABO puede realizarse mediante una técnica en porta o en tubo. Los hematíes problema, contienen sustancias antigénicas del sistema ABO, se enfrentan con antisueros (aglutininas) dirigidos contra esos antígenos
Resultado final: aglutinación directa cuando reaccionan contra el antisuero
Para estudios in vitro se utilizan anticuerpos anti-A, anti-B y anti-AB. Sin embargo, como aglutininas anti-A1 o anti-H se utilizan lectinas (proteínas presentes en algunas plantas capaces de aglutinar a los hematíes humanos)
Es importante mencionar que todas estas determinaciones deben hacerse a temperatura ambiente, ya que la aplicación del calor puede afectar a los hematíes impidiendo observar una posible aglutinación
En resumen, consiste en observar la aglutinación de los hematíes enfrentados a una serie de antisueros conocidos y de reconocida eficacia, para determinar el grupo ABO del individuo
Muestra: sangre capilar o sangre total anticoagulada



 

 

http://neetcurioso.com/wp-content/uploads/2013/08/gota-de-sangre.jpg

 

 

MATERIAL

• Portaobjetos
• Rotulador
• Pipeta Pasteur
• Palillos
• Reloj

REACTIVOS

• Suero anti-A

Imagen realizada en el Laboratorio

• Suero anti-B

Imagen realizada en el Laboratorio

TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

• Dividimos el portaobjetos en 2 secciones una marcamos con la letra A y otra la letra B
• Depositar una gota de suero anti-A y suero anti-B en cada parte correspondiente
• Situamos una gota de sangre junto a la gota de cada antisuero
• Mezclamos las gotas con un palillo y formando un círculo de 2 a 2,5 cm de diámetro
• Hacemos oscilar suavemente el portaobjetos hacia delante y hacia detrás durante dos minutos
• Observamos la presencia o ausencia de aglutinación

Imagen realizada en el Laboratorio: donde ha aglutinado en la sección B por tanto, es grupo B

 

 

OBSERVACIÓN

 

• Aglutinación: grumos rojos que flotan en un líquido claro, en el caso contrario los hematíes permanecen en forma de suspensión homogénea de color rojizo
• Estas pruebas son muy eficaces ya que la presencia de plasma en la muestra aumenta la velocidad de la reacción y el tamaño de los grumos
• El resultado puede observarse en unos segundos, aunque conviene reexaminar la reacción del anti-A al cabo de 2 minutos para comprobar que no se ha pasado por alto ninguna reacción débil

 

Hematíes y suero anti-A       Hematíes y suero anti-B     Grupo eritrocitario

 

               +                                              -                                          A

               -                                              +                                          B

              +                                             +                                         AB

               -                                              -                                           0

 

HOJA DE TRABAJO

 

A) ¿Qué tipo de técnica inmunológic se emplea en este análisis?

Aglutinación

 

B) ¿Qué muestra utilizamos?

Sangre capilar o sangre anticoagulada

 

C) ¿Cómo se ve la aglutinación positiva?

Grumos rojos que flotan en un líquido claro

 

D) ¿Qué debemos hacer si el grupo obtenido es A?

Los hematíes problema deberán de ser ensayados de nuevo con lectina anti-a1, si produce aglutinación, el sujeto pertenerá al subgrupo A1

 

Valoración de los resultados

 

La sangre analizada es del grupo eritrocitario:

 

 

Imagen realizada en el Laboratorio, donde tenemos a una persona del grupo A, otra del grupo B y otra del grupo 0
 

Gráfica de la clase de 1º de Laboratorio de Diagnóstico Clínico