PRÁCTICA X (7/11/14)

 

TINCIÓN SUPRAVITAL CON AZUL DE METILENO

INTRODUCCIÓN

Al investigar las estructuras celulares podemos utilizar dos formas diferentes de tinción, aquellasa que se hacen con tejido muerto y las que utilizan células vivas o tejidos para su observación.
Entre las células vivas podemos diferenciar: las tinciones vitales: introducción de un colorante en la circulación de un organismo vivo. Tinciones supravitales: emplean el colorante sobre células o tejidos vivos aislados del organismo. En ambos casos lo que se destaca es los elementos de la célula viva y seguir los procesos vitales en el interior.
Vamos a teñir con azul de metileno que permite ver núcleos y algunas estructuras celulares.
Sangre capilar fresca o venosa anticoagulada.


MATERIAL

• Microscopio
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Tubos de hemólisis
• Pipetas Pasteur
• Lancetas
• Alcohol
• Gasa
• Vidrio de reloj
• Balanza
• Matraz aforado
• Varilla
• Vaso de precipitado
• Papel parafilm
• Agua destilada
• Embudo

REACTIVOS

• Azul de metileno 0,5 g
• Oxolato potásico 1,6 g

TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

• Primeramente preparamos el colorante, 0,5 g de azul de metileno, 1,6 g de oxolato potásico, lo ponemos sobre el vidrio de reloj, taramos la balanza y lo pesamos despues lo depositamos en la suficiente cantidad  de agua destilada en un vaso de precipitado
• Lo mezclamos todo con la varilla
• Vertimos nuestra disolución a un matraz aforado de 100ml con un embudo
• Con ayuda de una pipeta Pasteur aforamos el matraz
• Le ponemos papel parafilm lo movemos y lo dejamos 10 minutos
• Ahora desinfectamos bien la zona para extraer sangre capilar con alcohol y con ayuda de una gasa, movemos la mano y utilizamos la lanceta
• Desechamos la primera gota de sangre
• Colocamos la sangre en un portaobjetos o bien en un tubo de hemólisis, en este caso lo hizimos al tubo de hemólisis para mezclar bien con nuestra disolución
• Vertimos unas gotas de nuestra disolución junto con la sangre en el tubo y lo tapamos con papel parafilm durante 10 minutos
• Colocamos unas gotas sobre un porta cubriendo con un cubreobjetos
• Nos dirigimos a su observación microscópica

OBSERVACIÓN

A diferencia de nuestra anterior práctica de preparar sangre en fresco, con esta ya teñida podemos diferenciar leucocitos. La observación debe ser rápida ya que las células no permanecen vivas mucho tiempo.



https://www.google.es/search?q=tincion+supravital+azul+metileno&biw=1280&bih=705&source=lnms&tbm=isch&sa
=X&ei=uiqDVMqdBMmuU62qgOAP&ved=0CAYQ_AUoAQ#tbm=isch&q=tincion+
supravital+azul+metileno+sangre+en+fresco

HOJA DE TRABAJO

A) ¿ En qué se diferencia una tinción vital de una supravital? 
La vital es la que se introduce dentro del organismo vivo  y la  tinción supravital es con el tejido aislado del organismo

B) ¿Cuáles son los colorantes vitales más utilizados? 
El rojo neutro, el verde jano y el azul de metileno

C) ¿Qué tipo de estructuras tiñe selectivamente el verde jano? 
Las mitocondrias y orgánulos celulares

D) ¿Cuáles son las ventajas de una tinción supravital? 
Permiten la observación sobre células o tejidos vivos y seguir los procesos vitales en el interior de la misma

E) ¿Cuáles son los inconvenientes?
 No permanecen vivas mucho tiempo al estar separadas de su organismo.

PRÁCTICA IX (7/11/14)

PREPARACIÓN DE SANGRE EN FRESCO

 

INTRODUCCIÓN

La muestra en fresco para evitar los efectos de la tinción, como pueden ser la coagulación de las proteínas o la solubilización de los hidratos de carbono y grasas.
Podemos verla con sangre capilar o sangre venosa anticoagulada.
Es posible visualizar la estructura natural de las células, o los cambios estructurales en procesos patológicos, que de otro modo, podrían ser achacados al método de tinción.

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con+lancetas&imgdii=_

MATERIAL

• Microscopio
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Lancetas
• Pipetas Pasteur
• Gasa
• Alcohol

TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

• Vamos extraer sangre de nuestro dedo
• Primeramente desinfectamos la zona
• Movemos la mano para que así la sangre baje, preparamos la lanceta y nos pinchamos
• La primera gota se deshecha
• Echamos una gota en el porta e inmediatamente ponemos un cobre encima, así la gota se extiende
• Nos dirigimos a su observación microscópica.

OBSERVACIÓN

Pueden observarse los glóbulos rojos frescos aislados o agrupados en "pilas de moneda". Las plaquetas no tienen movilidad y tienden a agregarse formando acúmulos. En nuestra observación no se ve ni glóbulos blancos ni plaquetas.
En la muestra de sangre podemos observar la forma normal de los eritrocitos.

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HOJA DE TRABAJO

A) ¿Qué tipo de colorante empleamos aquí?

No empleamos ningún colorante

B) ¿Qué ventajas posee esta técnica?

Ver la estructura al natural de las células, ya que el colorante nos la modificaría

C) ¿Qué muestras podemos emplear?

Sangre capilar o sangre venosa anticoagulada.



PRÁCTICA VIII (6/11/94)

 

ESTUDIO MICROSCÓPICO DE LA CRISTALIZACIÓN DE LA SALIVA

INTRODUCCIÓN

Debido a la creciente concentración de estrógenos comienza a formarse en la saliva de la mujer, en el período preovulatorio unos cristales en forma de helecho, estos van aumentando a medida que nos vamos acercando a la ovulación.
En el período post-ovulatorio los cristales desaparecen hasta que ni se ven en la última semana del ciclo menstrual, desaparecen debido a la alta concentración de progesterona en el plasma.


MATERIAL

• Microscopio
• Portaobjetos
• Pipeta Pasteur

TÉCNICA O FUNDAMENTO

• Extraemos saliva de una mujer en período preovulatorio
• Primero se enjuaga la boca, para evitar suciedad en la saliva
• Depositar una gota en un portaobjetos
• Extender la gota con ayuda de otro porta
• Dejar la muestra hasta que esté secada
• Dirigirnos hacia su observación microscópica

OBSERVACIÓN

Enfocamos la muestra con todos los objetivos, excepto con el de inmersión.
Los cristales enfocados tienen aspecto de hojas de helecho.
Podemos encontrarnos ante 3 tipos de observaciones. La visualización clara y abundante nos indica que la mujer está ante un momento de fertilidad.
La visualización mediana no permite encuadrar a la mujer dentro de un estado patente de fertilidad o infertilidad.
Y por último, la visualización nula nos indica la situación de infertilidad.

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HOJA DE TRABAJO

A) ¿Qué hormonas hacen que cristalice la saliva?
Estrógenos

B) ¿Qué aspecto tienen los cristales que se forman en la saliva?
Forma de helecho

C) ¿Cómo es la cristalización de la saliva en un estado de fertilidad clara?
 Es abundante

RESULTADOS OBTENIDOS

La cristalización observada es: Clara y abundante

VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS

La mujer se encuentra en un estado de: Fertilidad clara

PRÁCTICA VI (6/11/14)

 

OBSERVACIÓN DE CÉLULAS DE MUCOSA BUCAL

 

 

 

INTRODUCCIÓN

Visualizaremos células animales,es decir, células de la mucosa bucal.


MATERIAL

• Microspio
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Vidrio de reloj
• Palillos
• Azul de metileno
• Mechero
• Agua destilada
• Pinzas de madera

TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

• Rascamos con el palillo dentro de la boca en la mejilla
• Dejamos el producto en un portaobjetos
• Con ayuda de otro porta extendemos un poco la extensión
• Dejamos quede bien fijada la muestra
• Colocamos el porta sobre el vidrio de reloj y añadimos una gota de azul de metileno
• Lo dejamos dos minutos
• Lavamos con agua destilada
• Nos dirigimos a la observación del microscopio

OBSERVACIÓN

Se ve el citoplasma claramente teñido.

A comparación, de nuestra anterior práctica de la observación de célula vegetal con la presente realizada de célula animal podemos apreciar que las células vegetales tienen mayor tamaño que las animales.

 

 

 

 

 

 

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PRÁCTICA V (5/11/14)

 

 

ANÁLISIS CEBOLLA

INTRODUCCIÓN

Cojemos tejido vegetal, una capa de la cebolla para visualizarla en el microscopio.


MATERIAL

• Microscopio
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Azul de metileno
• Vidrio de reloj
• Pinzas
• Cebolla
• Agua destilada

TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

• Separamos una capa de la cebolla
• Ponemos azul de metileno en el portaobjetos sobre la muestra
• La dejamos durante 2 minutos para que la muestra se tiña bien
• La enjuagamos con agua destilada
• La observamos en el microspio
• Ponemos un cubreobjetos

OBSERVACIÓN

Empezamos por el de menos aumento y enfocando bien encontrando así mismo la membrana vegetal y el citoplasma. Podemos observar estructuras que sin teñir no se verían.

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PRÁCTICA VII (6/11/14)

 

 

PREPARACIÓN DE SUERO SALINO

 

 

INTRODUCCIÓN

Prepararemos suelo salino para utilizar en laboratorio de hematología.
El suero salino es una disolución acuosa de sustancias compatibles con los organismos vivos, debido a sus características definidas de osmosis, pH y fuerza iónica.
También se utiliza para curar en la piel obstrucciones nasales y más finalidades corporales y sanitarias.



MATERIAL

• Agua destilada
• Mortero
• Varilla
• Vaso precipitado
• Sal
• Calculadora
• Embudo
• Matraz aforado
• Balanza
• Vidrio de reloj
• Espátula

TÉCNICA

• Disolución de suero salino a 5MOLAR

Inicialmente, vamos a conocer los gramos de sal que tenemos que preparar:

                     MOLES SOLUTO                                             MOLES
    5M =      _________________    ;                   5M=         _________         
              
                      L DISOLVENTE                                                  0,1
 
 
 
                           G                ;         MOLES= 0,5       ;                        G
      MOLES=  _____                                                            0,5M=  ______    ;    G= 29,25
                      
                         PM                                                                              58,5

Ya sabemos los gramos que necesitamos para preparar la disolución de suero salino, echamos la sal en el vidrio de reloj nos vamos hacia la balanza y la taramos y pesamos nuestros 29,25 g de sal y la disolvemos en 100ml, ya que no conocemos el volumen.
Echamos en el mortero la sal y la trituramos.
La diluimos en un vaso de precipitado con agua destilado con una varilla. Observación: nos ha costado diluir la sal.
Y por último la vertemos al matraz aforado y lo enrasamos.

• Preparar 100ml de suelo salino al 0,9%, a partir de la disolución 5M

V1  . V2 = C1 . C2                                 MOLES SOLUTO                                            
                                                      M=  ___________________
                                                                     
                                                               L DISOLVENTE   
DATOS:                                         0,9/58,5
                                                     _________     = 0,15 M

V1= ?                                                0,1
C1= 5M                                 
V2= 0,2 l                     
C2= 0,9%                                 V1 . 5 = 0,1 . 0,15       ;      0,003 L de disolución    ; 3 ml


Se coje con una pipeta Pasteur los 3ml y se vierten al vaso de precipitado luego se termina de enrasar con agua destilada.

https://www.google.es/search?q=pipetas&biw=1280&bih=705&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ei=5AuCVLeoBIG6Ue

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PRÁCTICA IV (18/10/14)

 

MANEJO DEL MICROSCOPIO

INTRODUCCIÓN

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MATERIAL

 

•  Microscopio
• Portaobjetos
• Hoja de papel cuadriculado
• Bolígrafo
• Cinta adhesiva transparante

 

PROCEDIMIENTO

 

1- Calcular el aumento obtenido con el uso combinado de los oculares y cada uno de los objetivos.

 

AUMENTO DE LOS OCULARES           AUMENTO DE CADA OBJETIVO          AUMENTO COMBINADO

                                                                                        4x                                                                               40x

                                                                                       10x                                                                              100x

                       10x                                                          40x                                                                              400x

                                                                                     100x                                                                            1000x

 

 

2- Dibujar en un trozo de papel cuadriculado un signo más con 2 trazos de 4 cuadrados cada uno y escribir:

• Una letra D, en el extremo derecho del signo más.
• Unas letras IZ, en el extremo izquierdo del signo más.
• Una letra SP, en el extremo superior del signo más.
• Unas letras IN, en el extremo inferior del signo más.

Enfocar la zona central del signo más, con cada uno de los objetivos. En primer lugar, con el de menos aumento e ir enfocando hasta terminar con el objetivo de mayor aumento.

3- Enfocar:

A) Desplazar el campo microscópico hacia la derecha.

                 Las letras visualizadas son IZ.

B) Desplazar el campo microscópico hacia la izquierda.

                 La letra visualizada es D.

C) Desplazar el campo microscópico hacia arriba.

                 Las letras visualizadas son IN.

D) Desplazar el campo microscópico hacia abajo.

                 Las letras visualizadas son SP.

E) Consecuencias extraídas de los resultados obtenidos:

                 Que funciona completamente al contrario (se ve invertido).

4- Enfocar con el objetivo de menor aumento, las letras rotuladas alrededor del signo más. Fijándose en las escalas longitudinal y transversal de la platina, establecer la posición exacta de cada una de esas letras. Resultados:

               LETRAS                   COORDINADA LONGITUDINAL               COORDENADA TRANSVERSAL
                    D                                             132                                                          11
                   IZ                                             147                                                          11
                  SP                                             138                                                            3
                  IN                                             139                                                          20

Y para finalizar la práctica IV, quitar el portaobjetos y guardar el microscopio sujetándolo firmemente con las dos manos, mantenerlo tapado con una funda y cuando vayamos a limpiar las lentes hacerlo con una gasa frotándolo suavemente.

                       

 



PRÁCTICA III (13/10/14)

DISOLUCION DE CLORURO DE SODIO (NaCl)

INTRODUCCIÓN

Disolver 5g de sal en 250 ml en agua destilada.

El cloruro de sodio es un compuesto iónico formado por un catión sodio (Na⁺) y un anión cloruro (Cl).

MATERIAL

• Agua destilada
• Sal
• Cucharilla
• Vidrio de reloj
• Báscula
• Vaso precipitado
• Pipeta
• Embudo
• Matraz aforado (250ml)
• Varilla

TÉCNICA

• Echamos sal en el vidrio de reloj y lo pesamos en la báscula le damos a tarar  echamos la correspodiente sal.
• Una vez medidos los 5g de sal lo echamos en el vaso precipitado  que su volumen sea más pequeño que el que queramos medir, por ejemplo, si nos dicen en 250ml como en este caso pues echar la sal en un vaso de precipitado de por ejemplo 100ml, una vez disuelta con auda de la varilla la vertimos con el embudo y cae en el vaso de precipitado, añadimos agua destilada enjuagando el otro vaso de precipitado donde hemos hecho la dislución  enrasamos el matraz con auda de una pipeta Pasteur.

 
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