lunes, 8 de diciembre de 2014

PRACTICA XIV (13/11/14)

 
TINCIÓN DE WRIGHT


INTRODUCCIÓN

Utilizaremos sangre capilar fresca o venosa anticoagulada. Los anticoagulantes más adecuados son la heparina y el EDTA.
El colorante más utilizado es una solución de eosina y una mezcla de azul de metileno del 50-75% y azur B del 10-25% junto con otros derivados del alcohol metílico.
No es necesario fijador por la presencia de metanol, en la composición del colorante. Sólo si se van a guardar las extensiones sin teñir de un día para otro precederemos a su fijación para evitar el deterioro del frotis.



MATERIAL
  • Microscopio
  • Cristalizador
  • Puentes de tinción
  • Pipetas Pasteur
  • Tubos de ensayo


REACTIVOS
  • Solución eosina-azul de metileno según Wright
  • Solución tampón pH 7,2
  • Aceite de inmersión

TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
  • Realizar nuestra extensión sanguínea
  • Cubrir la extensión con 1 ml de colorante Wright
  • Lavar con tampón pH 7,2 y dejar secar en posición vertical
  • Preparar colorante diluido 0,5ml de colorante Wright y 0,5ml de tampón pH 7,2, y cubrir la extensión durante 5minutos
  • Lavar con agua destilada y dejar secar
  • Observar con el objetivo de 100x y  su aceite de inmersión

OBSERVACIÓN

Las células observadas de la misma manera que en la tinción de Giemsa, igual color.

https://www.google.es/search?q=tincion+supravital+azul+metileno&biw=1280&bih=705&source=lnms&tbm=
isch&sa=X&ei=uiqDVMqdBMmuU62qgOAP&ved=0CAYQ_AUoAQ#tbm=i
sch&q=tincion+de+wright+sangre&imgdii=_




HOJA DE TRABAJO

A) ¿Qué tipo de colorante utilizamos en esta tinción?
Eosina-azul de metileno según Wright

B) ¿Qué sustancia empleamos como fijador?
Ningua, ya que el colorante ya lo lleva

C) ¿Cuánto tiempo debe estar en contacto el frotis con el colorante diluido?
De 3 a 5 minutos

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