martes, 17 de febrero de 2015

PRACTICA XXVI (15/01/15)


DETECCIÓN DE CRIOGLOBULINAS


INTRODUCCIÓN

Son inmunoglobulinas aisladas o complejos inmunes que estan alterados, esta alteración hacen que se vuelvan insolubles y precipiten en el suero cuando están expuestas a una temperatura inferior a la normal del cuerpo humano.
Hay 3 tipos de crioglobulinemias
Tipo 1: trastornos proliferativos
Tipo 2: hepatopatías crónicas
Tipo 3: procesos autoinmunes
La detección de crioglobullinas se basa en la exposición del suero problema a la acción de una temperatura baja unos 4ºC, a esta temperatura las crioglobulinas precipitan más.
Si el suero problema contiene crioglobulinas, éstas precipitan con el frío, y el precipitado formado adopta el aspecto de partículas blanquecinas.
Centrifugar la muestra a 3500rpm/15min
La muestra es suero transparente, obtenido de sangre coagulada completamente a temperatura corporal, y separado del coágulo en un ambiente cálido.
Es importante evitar que la coagulación se produzca en un ambiente frío, pues esto puede dar lugar a la formación de una pequeña cantidad de crioglobulinas.


MATERIAL
  • Pipeta Pasteur
  • Tubo de ensayo
  • Gradilla
  • Nevera
  • Baño de agua
  • Capilar de microhematocrito no heparinizado
  • Plastilina
  • Centrífuga de microhematocrito
  • Regla o lector de microhematocrito
 
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TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
  • Depositar el suero problema en un tubo de ensayo
  • Colocar el tubo que contiene el suero problema en una nevera, de forma que esté a una temperatura comprendida entre los 4 y 6ºC
  • Examinar el tubo a los 30 minutos y después cada día, durante 6 días
     
OBSERVACIÓN
 
 
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  • Si aparecen partículas blanquecinas en el suero, éste ha de ser incubado a 37ºC. Cuando no desaparecen las partículas, tras la incubación, se considera que éstas se deben a restos de fibrina
  • Cuando desaparecen, se estima que son crioglobulinas precipitadas (prueba positiva)
  • Discretamente turbio: su grado de positividad es +
  • Francamente turbio: su grado de positividad es ++
  • Lechoso: su grado de positividad es +++
  • En el caso de que la prueba sea positiva, puede realizarse una semicuantificación de las crioglobulinas presentes en el suero, mediante la determinación del criocrito
  • Se mide:
  • 1º llenar un capilar con el suero problema las 3/4 partes, 2º sellarlo con plastilina en el extremo por donde ha entrado el suero, 3º enfriarlo a 4-6ºC hasta que se produzca la precipitación máxima de las crioglobulinas, 4º centrifugar y por último paso calcular el porcentaje que supone la columna de precipitado, con respecto a la columna total de suero
  • El criocrito es la relación existente entre el volumen ocupado por el precipitado de crioglobulinas y el ocupado por el suero total, expresado en forma de porcentaje.
  • Sus manifestaciones clínicas: aumento de la viscosidad de la sangre, precipitación de las crioglobulinas y depósito de inmunocomplejos


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HOJA DE TRABAJO

A) ¿A qué temperatura se debe someter el suero en una detección de crioglobulinas?
A unos 4ºC

B) ¿Cuántas cruces se le asigna a un suero que adquiere un aspecto lechoso?
+++

C) ¿A qué concentración sérica suelen encontrarse las crioglobulinas tipo I?
Mas 5 mg/ml

D) ¿Qué manifestaciones clínicas puede producir una crioglobulinemia?
Aumento de la viscosidad de la sangre, precipitación de las crioglobulinas y depósito de inmunocomplejos

VALORACION DE LOS RESULTADOS

En el suero problema:
No hay crioglobulinas

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