RECUENTO DE PLAQUETAS CON HEMOCITÓMETRO
INTRODUCCIÓN
En el siguiente recuento, se diluye la sangre problema en un líquido apropiado, y se deposita en una cámara de recuento, donde se cuenta las células presentes en alguno de los cuadrados de uno de los retículos. Se utiliza sangre capilar o venosa extraída recientemente y recogida en un tubo con EDTA.
B&ved=0CAYQ_AUoAQ#tbm=isch&q=plaquetas+&imgdii=WqLYjQwbU_PcxM%3A%3B523ZB2qweOAtOM%3BWqLYjQwbU_PcxM%3A&imgrc=WqLYjQwbU_PcxM%253A%3BqGYwXq4z1VniUM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.escuelapedia.com%252Fwp-content%252Fuploads%252FLas-plaquetas.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.escuelapedia.com%252Fplaquetas%252F%3B800%3B600
- Tubo de ensayo, preferible de plástico
- Pipeta diluidora de Thoma, para recuento de glóbulos rojos
- Cámara de recuento, con retículo Neubauer mejorado
- Cubreobjetos
- Microscopio
- Placa de Petri
- Papel de filtro
N8XvasHXgYgF&ved=0CAYQ_AUoAQ#tbm=isch&q=pipeta+diluidora+de+thoma%2C+globulos+rojos&imgdii=_&imgrc=6TPmMMoFa4KvhM%253A%3Bn6LU7OeNFTS49M%3Bhttp%253A%252F%252Fhtml.rincondelvago.com%252F000759864.jpg%3Bhttp%253A%252F
%252Fhtml.rincondelvago.com%252Frecuentos-celulares.html%3B250%3B187
REACTIVOS
- Agua destilada
- Líquido de dilución
TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
- Verter en un tubo de ensayo el volumen necesario de líquido de dilución, éste no ha de ser reintegrado al frasco, para evitar contaminarlo
- Con la pipeta diluidora aspirar la sangre hasta la señal de 1
- Limpiar el exterior de la pipeta con ayuda de una gasa
- Aspirar el líquido de dilución hasta la señal de 101 de la pipeta
- Agitarla durante 5 minutos
- Desechar las 5 primeras gotas
- Cargar adecuadamente la cámara de recuento
- Colocarla en el interior de una cámara húmeda, se deposita papel de filtro con agua y se desposita encima nuestra cámara de recuento
- La dejamos reposar durante 15 minutos, ésta evita el resecamiento de la dillución de sangre presente en la cámara de recuento y el reposo asegura la sedimentación completa de todas las plaquetas
- La colocamos sobre el microscopio y realizamos el contaje de plaquetas
La limpieza de la pipeta de Thoma se realiza:
Haciendo tres aspiraciones 1º en agua del grifo, 2º agua destilada y 3º en alcohol, y seguidamente la secamos con el secados preferiblemente
La limpieza de cámara de recuento se realiza:
Aclarando con agua tibia, después agua destilada y secamos con un paño suavee dejándolo al aire
OBSERVACIÓN
- Los trombocitos se observan como corpúsculos redondeados u ovalados, de tamaño muy pequeño y muy refrigerentes, no hay que confundirlos con leucocitos o bien, partículas de polvo
- Se calcula:
- PLT/mm3: P x V x D = P x 1000 ( P: nº plaquetas contadas en un cuadrado grande, V: correción de volumen (10), D: correción de dilución (100)
- Si la cifra obtenida es muy reducida se efectúa una dilución menor de la muestra y se cuentan los trombocitos depositados en varios cuadrados grandes
- Si es muy elevada, se efectúa una dilución mayor de la muestra
- Esto implica un ajuste de los cálculos necesarios para obtener el PLT/mm3 y tiene por objeto el confirmar los resultados obtenidos
8XvasHXgYgF&ved=0CAYQ_AUoAQ#tbm=isch&q=observacion+micrococpica+plaquetas+ca
mara+de+recuento&imgdii=_&imgrc=1DtbejXUUQDqlM%253A%3B_R8Iko2P_huHGM%3Bhttp%253A%252F%252F4.bp.blogspot.com%252F-Jyjx3yzlP7Y%252FT2-15p6ruQI%252FAAAAAAAAAbc%252FLTPfTj2IJ8A%252Fs1600%252FIMG02600-20120321-0846.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fedurirom.blogspot.com%252F2012%252F03%252Fpractica-no-6-recuento-de-plaquetas-con.html%3B1312%3B1137
HOJA DE TRABAJO
A) ¿Qué tipo de pipeta diluidora se utiliza en el recuento de plaquetas?
Pipeta diluidora de Thoma
B) ¿Qué funciones desempeña el líquido de dilución empleado?
Este líquido rompe los hematíes, evita la agregación de las plaquetas entre sí y su adhesión a otros elementos, y facilita la visualización de las plaquetas al hacerlas refringentes
C) ¿Cuánto líquido de dilución se necesita para efectuar el ensayo?
Aproximadamente 1 ml
D) ¿Con qué se puede preparar una cámara húmeda?
Recortamos papel de filtro ajustándolo a una placa de Petri
E) ¿Con qué objetivo se cuentan las plaquetas?
Primero con el de 10x y seguidamente con 40x
F) ¿Cómo se aprecian los trombocitos en este recuento?
Como corpúsculos redondeados u ovalados, de tamaño muy pequeño y refringentes
No hay comentarios:
Publicar un comentario