PRUEBA CRUZADA MAYOR
INTRODUCCIÓN
El objetivo de las pruebas pre-transfusionales es detectar las posibles reacciones antígeno-anticuerpo entre la sangre del donante y del receptor, antes de la transfusión
Hay que hacer una serie de determinaciones:
Tipaje correcto del grupo ABO y Rh del donante y del receptor
Escrutinio de los anticuerpos irregulares en el receptor
Prueba cruzada mayor
Otras pruebas son: prueba cruzada menor (sólo se realiza cuando se transfunde gran cantidad de plasma) y autocontrol
Estas pruebas deben realizarse en medio salino y albuminoso
El fundamento de esta práctica es enfrentar el suero del receptor con los hematíes del donante primero en medio salino y luego albuminoso y por último frente al suero antiglobulina de Coombs. Detectaremos los anticuerpos que se hayan quedado fijados en la membrana
Es importante respetar los tiempos de incubación
Muestra: suero del receptor obtenido de sangre coagulada y libre de hemólisis. Debe ser fresco y conservado a 4ºC
Y, hematíes del donante, previamente lavados y resuspendidos al 2-5%
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MATERIAL
- Tubos de hemólisis
- Centrífuga
- Baño de agua
- Pipeta Pasteur
- Gradilla
- Reloj
REACTIVOS
- Solución salina fisiológica
- Albúmina bovina al 30%
- Suero antiglobulina de Coombs
Imagen realizada en el Laboratorio
TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
- Depositar una gota de suspensión de hematíes del donante y 2 gotas del suero del receptor
- Mezclar
- Dejar a temperatura ambiente durante 2-3 minutos
- Centrifugar 3500 rpm durante 30 segundos
- Leer el resultado en medio salino
- Añadir 3 gotas de albúmina bovina al 30%
- Mezclar
- Incubar a 37ºC durante 30 minutos
- Centrifugar 3500 rpm durante 30 segundos
- Leer los resultados en medio albuminoso
- Lavar 3 veces los hematíes con solución salina para eliminar los anticuerpos que no se han fijado a los eritrocitos
- Retirar sobrenadante del último lavado
- Añadir una gota de suero antiglobulina humana de Coombs
- Mezclaar
- Centrifugar a 1000 rpm durante 2 minutos
- Leer resultados
OBSERVACIÓN
- La lectura se realiza resuspendiendo el botón hemático con suavidad después de cada una de las centrifugaciones
- Ausencia de aglutinación: sangres son compatibles y la transfusión es compatible
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- La aglutinación en cualquiera de las fases de la prueba indica incompatibilidad, igual que si observamos hemólisis
- Es conveniente realizar esta prueba en medio enzimático, dado que refuerza las reacciones antígeno-anticuerpo, se usa para re-examinar a los receptores que han sufrido reacciones transfusionales
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HOJA DE TRABAJO
A) ¿Qué se enfrenta en la prueba cruzada mayor?
Suero del receptor con hematíes del donante
B) ¿Cuando se debe realizar la prueba cruzada menor?
Cuando se transfunde una gran cantidad de plasma
C) ¿Por qué debemos realizar la prueba en medio salino y albuminoideo?
Para detectar todos los anticuerpos presentes
D) ¿Qué pone de manifiesto el suero antiglobulina de Coombs?
Detectar anticuerpos que hayan quedado fijados a la membrana eritrocitaria
Valoración de los resultados
Las sangres analizadas son: Compatibles
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