PRACTICA XLVIII (7/05/15)

 

DETERMINACIÓN DEL FENOTIPO Y GENOTIPO DEL SISTEMA Rh

INTRODUCCIÓN

El genotipo de una persona es su dotación genética en el cromosoma, y el fenotipo es la manifestación de ese genotipo. El fenotipo es la sua total de antígenos detectados en los hematíes mediante el empleo de antisueros específicos
El fenotipo puede ser idéntico al genotipo
Dado que no existe el antígeno d, ni el anticuerpo anti-d, es imposible determinar si el antígeno D es homozigoto o heterozigoto mediante su detección en los hematíes. Determinamos el genotipo más probable
El interés en la determinación del genotipo se debe a que existen casos de madres inmunizadas frente a D, y conviene conocer si el padre es o no homozigoto para D, antes de producrise un nuevo embarazo. Un padre homozaigoto D transmitirá el gen D a todos sus hijos, mientras que uno heterozigoto lo transmitirá con un 50% de probabilidades
El fenotipo se determina enfrentando los hematíes problma con los antisueros anti-D, anti-C, anti-E, anti-c y anti-e
El genotipo más probable dependerá de la raza o el grupo étnico
El genotipo del sistema Rh se enfrentan a los hematíes problema a distintos antisueros dirigidos contra los antígenos que componen el sistema Rh, la existencia o no de estos antígeno en la superficie de los hematíes se detecta por una reacción de aglutinación. Los resultados se trasladan a una tabla donde vemos los posibles genotipos
Muestra: Suspensión de hematíes lavados al 5%

 

 

http://biologia.uab.es/base/myimages/cursogenetica/genotipo-fenotipo.jpg

 

MATERIAL

• Tubos de centrífuga
• Centrífuga
• Rotulador
• Pipetas Pasteur
• Gradilla

REACTIVOS

• Suero anti-D
• Suero anti-E
• Suero anti-C
• Suero anti-e
• Suero anti-c
• Solución salina fisiológica

Imagen realizada en el Laboratorio

TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

• Cogemos nuestra muestra al 5%
• Rotulamos nuestros 5 tubos, cada uno con su letra correspondiente
• En cada tubo añadimos una gota del antisuero y una gota de la suspensión de hematíes

• Homogeneizamos suavemente
• Centrifugar a un minuto durante 1000 rpm

OBSERVACIÓN

• Golpeamos suavemente para despegar el sedimento hemático
• El resultado positivo es la presencia de aglutinación y se observa la presencia de grumos rojos sobre un líquido claro. Indica la presencia del antígeno del sistema Rh buscado en ese tubo
• La ausencia de aglutinación es un resultado negativo, y se obsera como la suspensión homogénea de los hematíes en un líquido rojizo
• Los cinco resultados obtenidos expresan el fenotipo de la sangre analizada
• Si la sangre analizada es Rh negativa (D-) se determina su único genotipo posible con respecto al sistema Rh. Si la sangre es Rh positiva (D+) existen varios genotipos posibles que dan lugar al fenotipo previamente detectado

 

http://gsdl.bvs.sld.cu/greenstone/collect/preclini/index/assoc/HASH092e.dir/tab6.12.png

 

 

HOJA DE TRABAJO

 

A) ¿Qué antisueros se utilizan en esta técnica?

Anti-D, anti-E, anti-C, anti-e y anti-c

 

B) ¿Qué expresan los cinco resultados obtenidos?

Fenotipo de la sangre

 

C) Si la sangre es Rh+, ¿puede determinarse su genotipo con respecto al sistema Rh?

Existen varios genotipos que dan lugar al fenotipo detectado

 

D) Si los resultados obtenidos son: D-, C-, E+, c+ y e- ; ¿cuál es el genotipo posible de esta sangre?

Rh-

dcE/dcE

 

 

Valoración de los resultados

 

El/los genotipo/s posible/s del sistema Rh en la sangre analizada es/son: No nos ha salido bien ya que los hematíes estaban mal lavados

La hemos realizado una segunda vez, dando los siguiente resultados:

D= +

C= -

E= +

e= +

c=+

Es Rh positivo y su genotipo posible es: DcE/dce      DcE/Dce        Dce/dcE