PRACTICA XLIII (23/04/15)

 

DETERMINACIÓN CELULAR EN TUBO

INTRODUCCIÓN

Los hematíes problema contienen sustancias antigénicas del sistema ABO y se enfrentan a sueros conocidos que poseen anticuerpos frente a esos antígenos
Resultado final es la presencia o no de aglutinación en los hematíes reaccionantes
Muestra: sangre total anticoagulada, aunque es preferible usar una suspensión de los hematíes problema

MATERIAL

• Tubos de centrífuga
• Rotulador
• Pipetas Pasteur
• Centrífuga
• Gradillas

REACTIVOS

• Suero anti-A
• Suero anti-B
• Suero anti-AB
• Solución salina fisiológica

 

Imagen realizada en el Laboratorio

 

 

TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

• Coger la muestra de los hematíes lavados al 2%
• Rotular los 3 tubos de ensayo con las letras A, B y AB
• Añadir a cada tubo una gota de suspensión de hematíes al 2%
• Añadir dos gotas de suero anti-A en el tubo A, dos gotas de anti-B en el tubo B y dos gotas de anti-AB en el tubo AB
• Centrifugar 1000 rpm durante 1 minuto

 

Imagen realizada en el Laboratorio


OBSERVACIÓN

• Golpeamos para desprender el sedimento y observamos la presencia o ausencia de aglutinación
• Reacción negativa: los hematíes se resuspenden homogéneamente
• Reacción positiva: se observa un botón de hematíes que permanece unidos una vez desprendido el sedimento
• Se realiza igual que la técnica en porta
• Los restos de detergente o sustancias extrañas pueden ocasionar falsos negativos
• Falsos positivos:
• Aglutinación no específica: presencia de ácido hialurónico en la sangre
• Fenómeno de Rouleaux: imagen de pilas de moneda, las sustancias que pueden originar este fenómeno son el fibrinógeno, el dextrano
• Estos fenómenos se evitan con: lavado previo de los hematíes problema

Imagen realizada en el Laboratorio

 

 

HOJA DE TRABAJO

 

A) ¿Qué tipo de técnica inmunológica se emplea en este análisis?

Aglutinación

 

B) ¿A qué concentración se prepara la suspensión de hematíes problema?

Al 2%

 

C) ¿Cómo se ve una aglutinación positiva?

Se ve enn precipitado, en grumos

 

D) ¿A qué se debe el fenómeno de Rouleaux?

Al no realizar el lavado previo de hematíes

 

E) ¿Cómo se pueden evitar los falsos positivos?

Realizando un lavado previo de hematíes

 

Valoración de los resultados

 

La sangre ensayada es del grupo eritrocitario: 0