DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE PROTROMBINA (TP)
INTRODUCCIÓN
El TP es el tiempo que tarda en coagular un PPP, cuando se pone en contacto con un exceso de calcio y de tromboplastina hística (procede extractos de cerebro o pulmón de hombre o animales, generalmente de conejo o vaca)
Los factores extrínsecos de la coagulación se activan en presencia de tromboplastina cálcica en plasma citratado, el proceso de medición del tiempo de protrombina en una etapa única, mide el tiempo de coagulación del plasma después de la adición del reactivo
También llamado tiempo de Quick ha servido para determinar trastornos de la coagulación la PT es la determinación más frecuente junto con la APTT
La PT es sensible a las anomalías de los factores extrínsecos de la coagulación (factor II, V, VII, X y fibrinógeno) así como sus inhibidores, es además un indicador en enfermedades hepáticas
Se utiliza para la monitorización de las terapias con anticoagulantes
La muestra es plasma obtenido por punción venosa diluido 1/10 en solución de citrato trisódico 3,8%, mezclar la sangre con el anticoagulante, evitando la formación de espuma
Centrifugar la muestra a 1500 x g 15min y transferir el plasma a contenedores de vidrio siliconado o plástico
Los plasmas turbios, ictéricos, lipémicos o hemolizados pueden dar resultados erróneos
La muesstra es estable 2horas a temperatura ambiente (15-25ºC) o 4 horas a 2-8ºC
No usar como anticoagulantes oxalato sódico, EDTA o heparina
MATERIAL
- Gradilla
- Cubeta coagulómetro
- Trocitos de acero para depositr dentro de cada cubeta
- Pipeta automática para dispensar 100 y 200 microlitros
- 2 puntas de pipeta para contener 100 y 200 microlitros (amarillas)
- Coagulómetro
- Baño de agua 37ºC
- 2 tubos de ensayo de plástico
- R: tromboplastina calcica liofilizada, extracto de acetona deshidrata de cerebro de conejo y CaCl2. Tampón y conservantes
- Opcional: Control normal y contro pathologic
- RT: reconstituir el contenido con 4ml de agua destilada, mezclar hasta disolver su contenido e incubar 15 min a temperatura ambiente
El ISI de cada reactivo de tromboplastina cálcica comercial puede ser diferente y puede variar de un lote a otro, por lo que debe mirarse en el folleto de instrucciones que se adjunta a cada envase
La tasa de PT (PR) se puede convertir a su correspondiente valor internacional usando el índice internacional de sensibilidad (ISI), así se obtiene la tasa normalizada internacional INR
TECNICA O PROCEDIMIENTO
- Calentar a 37ºC el RT y la muestra
- RT: mezclar 200 microlitros
- Incubar 5min a 37ºC
- Pipetear plasma citratado 100 microlitros
- Poner en marcha el coagulómetro medir el tiempo de formación del coágulo, inmediatamente después de la adición del reactivo
OBSERVACIÓN
- Los valores se expresan en %, también en segundos pero lo haremos de forma de porcentaje
INR= TP del plasma del paciente/ TP de plasma control normal elevado ISI
- El TP es el tiempo transcurrido desde la adición de la tromboplastina cálcica hasta la formación del coágulo de fibrina
- INR cociente corregido con el ISI de la tromboplastina hística
- El valor en segundos del TP determiando en la muestra se interpola en la curva de actividad de la protrombina preparada, y se halla el porcentaje de activiad de la protrombina que le corresponde
- El resultado puede expresarse en forma de cociente o proporción (ratio) entre el valor, en segundos del TP de la muestra y de plasma control normal no diluido
- Valores normales: 11 y 15 segundos
- % de actividad de la protrombina de plasma normal oscila entre 70 y 100%
- La ratio de protrombina normal 0,9 y 1,15
- El tiempo de protrombina está alargado, el % de actividad disminuido y la ratio aumentada en pacientes con déficits de factores de la vía extrínseca, en enfermos sometidos a terapias con dicumarinas y en pacientes con trastornos hepáticos
HOJA DE TRABAJO
Hemos obtenido 5,1 y de ratio 0,18
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